OBJETIVO: Analisar a imunoexpressão das proteínas COX-2, p53 e caspase-3 em adenomas colorretais e na mucosa não neoplásica. MÉTODOS: Foram submetidos à colonoscopia 72 indivíduos que forneceram 50 amostras de adenomas e 45 de mucosa colorretal não neoplásica. Os tecidos foram obtidos pela técnica de arranjo em matriz (tissue microarray) e submetidos a estudo imunoistoquímico com anticorpos primários p53, COX-2 e caspase-3. A positividade e intensidade da imunorreação foram classificadas. Foram estudadas as seguintes variáveis: localização do adenoma no colo, grau de displasia, tamanho, e escores de positividade e intensidade da imunoexpressão das proteínas p-53, caspase-3 e COX-2. RESULTADOS: Nos adenomas, a imunoexpressão da proteína p53 mutada foi positiva em 30 (60%) e negativa em 20 (40%) amostras. Na mucosa colorretal não neoplásica, a imunoexpressão da proteína p53 mutada foi negativa em 39 (86,6%) amostras e positiva em 6 (13,3%) (p<0,0001). Houve diferença significativa entre o maior tamanho (p=0,006) e o maior grau de displasia dos adenomas (p<0,0001) e a intensidade de imunoexpressão da proteína p53 mutada. A positividade e intensidade da imunoexpressão das proteínas COX-2 (p=0,14) e caspase-3 (p=0,23), nos adenomas e na mucosa colorretal não neoplásica, não apresentaram diferença significante. CONCLUSÃO: A proteína p53 mutada é hiperexpressada nos adenomas em comparação com a mucosa não neoplásica. Nos adenomas, o maior tamanho e o maior grau de displasia foram associados à maior expressão da proteína p53 mutada. A imunoexpressão das proteínas COX-2 e caspase nos adenomas não apresentou correlação com os aspectos anatomopatológicos e não foi diferente em termos de níveis de expressão correspondentes na mucosa não neoplásica.

OBJECTIVE: To analyze the immunoexpression of the COX-2, p53, and caspase-3 proteins in colorectal adenomas and non-neoplastic mucosa. METHODS: 72 individuals were subjected to colonoscopy, which provided 50 samples of adenomas and 45 samples of non-neoplastic colorectal mucosa. The tissue samples were obtained via the tissue microarray technique and subjected to immunohistochemical analysis using primary anti-p53, anti-COX-2, and anti-caspase-3 antibodies. The positivity and intensity of the immunoreaction were classified. The analyzed variables were as follows: site of the adenomas in the colon, degree of dysplasia, size, and score of positivity and intensity of immunoexpression of the p-53, caspase-3, and COX-2 proteins. RESULTS: The immunoexpression of mutated protein p53 was positive in 30 (60%) adenoma samples and negative in 20 (40%) adenoma samples. The immunoexpression of mutated protein p53 was negative in 39 (86.6%) samples and positive in 6 (13.3%) samples of the non-neoplastic colorectal mucosa (p<0.0001). Significant differences were seen between both the largest size (p=0.006) and the highest degree of dysplasia (p<0.0001) of the adenomas and the intensity of immunoexpression of mutated protein p53. The positivity and intensity of immunoexpression of COX-2 (p=0.14) and caspase-3 (p=0.23) showed no significant differences between the adenomas and the non-neoplastic colorectal mucosa. CONCLUSION: Mutated protein p53 was hyperexpressed in the adenomas compared with the non-neoplastic mucosa. Greater size and greater degree of dysplasia in the adenomas were associated with higher expression of mutated protein p53. The immunoexpression of COX-2 and caspase-3 in the adenomas did not exhibit a correlation with the anatomical-pathological features of the tumors and did not differ from the corresponding expression levels in the non-neoplastic mucosa.

INTRODUÇÃO: A importância do estudo da placenta de gestantes com o vírus da imunodeficiência humana (HIV) soropositivas tornou-se alvo de inúmeros trabalhos na literatura. Aspectos morfológicos, virais, imunes e inflamatórios intrínsecos ao tecido placentário foram analisados para o entendimento da transmissão vertical do vírus. OBJETIVO: Identificar as lesões mais frequentes nas placentas, associando-as ao antígeno viral e correlacionando-as com a infecção dos recém-nascidos. MATERIAL E MÉTODOS: Trinta e cinco placentas de gestantes HIV soropositivas foram analisadas por estudo anatomopatológico e imuno-histoquímico, utilizando o anticorpo p24, no período de 1992 a 1997, segundo a rotina do laboratório do Serviço Anatomia Patológica/Hospital Universitário Antônio Pedro/Universidade Federal Fluminense (SAP/HUAP/UFF). RESULTADOS: As alterações microscópicas registradas em todos os casos, inclusive nos de transmissão vertical, foram arteriopatia no circuito vascular fetal, corionamnionite, depósito fibrinoide perivilositário, excesso de nós sinciciais, edema do estroma viloso e dismaturidade vilosa. Nenhuma alteração microscópica ou macroscópica específica do HIV foi encontrada nas placentas. A infecção neonatal pôde ser constatada em cinco casos. A transmissão vertical foi identificada em duas placentas entre cinco que tinham baixo peso para a idade gestacional. Análise da imuno-histoquímica do p24 mostrou 14 casos positivos, dois dos quais apresentaram transmissão vertical. A proteína viral não foi identificada em 10 das 14 placentas cujas pacientes foram medicadas com zidovudina (AZT). CONCLUSÃO: Nosso estudo contribuiu para o estudo anatomopatológico da placenta de pacientes soropositivas para o HIV, porém a expressão do p24 por si só não permitiu um diagnóstico definitivo e precoce da transmissão vertical.

INTRODUCTION: The study of placentas from pregnant human immunodeficiency virus (HIV) positive women has become the subject of numerous studies in the literature. Morphological, viral, immune and inflammatory placental aspects have been analyzed in order to grasp the vertical transmission of the virus. OBJECTIVE: To identify the most frequent findings in the placentas by associating them with a viral antigen and correlating them with the infection of newborns. MATERIAL AND METHODS: Thirty-five placentas from HIV- positive pregnant women were pathologically and immunohistochemically analyzed with the use of p24 antibody in the period from 1992 to1997 in accordance with the routine laboratory testing from the Anatomopathological Department - Hospital Universitário Antônio Pedro - Universidade Federal Fluminense (APD/HUAP/UFF). RESULTS: The microscopic alterations detected in all cases, including those with vertical transmission, were arteriopathy in the fetal blood circulation, chorioamnionitis, perivillous fibrin deposition, syncytial knotting, villous edema and villous immaturity. No specific macroscopic or histopathological changes were found in these placentas. The neonatal infection was observed in five cases. Vertical transmission was identified in two out of five placentas that had low weight for the respective stage of pregnancy. Immunohistochemical analysis revealed 14 positive cases, two of which showed vertical transmission. The viral protein was not identified in 10 out of 14 placentas from patients who had been medicated with zidovudine (AZT). CONCLUSION: Our study has contributed to the anatomopathological investigation into placentas from HIV-positive patients, although p24 expression per se did not allow a definite and early diagnosis of the vertical transmission.

OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the effect of oral tamoxifen treatment on the number of myofibroblasts present during the healing process after experimental bile duct injury. METHODS: The sample consisted of 16 pigs that were divided into two groups (the control and study groups). Incisions and suturing of the bile ducts were performed in the two groups. Tamoxifen (20 mg/day) was administered only to the study group. The animals were sacrificed after 30 days. Quantification of myofibroblasts in the biliary ducts was made through immunohistochemistry analysis using anti-alpha smooth muscle actin of the smooth muscle antibody. Immunohistochemical quantification was performed using a digital image system. RESULTS: In the animals treated with tamoxifen (20 mg/day), there was a significant reduction in immunostaining for alpha smooth muscle actin compared with the control group (0.1155 vs. 0.2021, p = 0.046). CONCLUSION: Tamoxifen reduced the expression of alpha smooth muscle actin in the healing tissue after bile duct injury, suggesting a decrease in myofibroblasts in the scarred area of the pig biliary tract. These data suggest that tamoxifen could be used in the prevention of biliary tract stenosis after bile duct surgeries.

OBJETIVO: Avaliar a regeneração hepática com modulação pelo pré-condicionamento isquêmico após isquemia, reperfusão e hepatectomia parcial. MÉTODOS: Foram usadas 24 ratas Wistar, de 12 semanas de idade, distribuídas randomicamente em quatro grupos: Grupo Controle (SHAM), Grupo Hepatectomia (HEP), Grupo Isquemia e Reperfusão (GIR) e Grupo Pré-condicionamento Isquêmico (PRE). Foi feita a análise das enzimas hepáticas ALT e AST, avaliação da regeneração através dos pesos inicial e final do fígado e da proliferação dos hepatócitos pela análise imunoistoquímica com o Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA). RESULTADOS: Em todos os grupos ocorreu regeneração do fígado, não havendo significância estatística entre eles. Houve diferenças significativas em relação a ALT e AST entre os grupos HEP-SHAM, GIR-PRE, GIR-SHAM E PRE-SHAM (p< 0,05). Também houve diferença significativa em relação à marcação de PCNA do grupo SHAM quando comparado aos demais grupos (p< 0,05). CONCLUSÃO: O pré-condicionamento isquêmico diminuiu a lesão hepática, mas não influenciou na regeneração até 48 horas.

OBJECTIVE: To evaluate liver regeneration modulated by ischemic preconditioning after ischemia, reperfusion and partial hepatectomy. METHODS: We used 24 Wistar rats of 12 weeks of age, which were randomly assigned into four groups: control (SHAM), hepatectomy (HEP), ischemia and reperfusion (IRG) and Ischemic Preconditioning (SRG). Analyses were made on liver enzymes ALT and AST, assessment of regeneration through the initial and final weight of the liver and the proliferation of hepatocytes by immunohistochemical analysis with Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA). RESULTS: In all groups there was liver regeneration, with no statistically significant difference between them. There were significant differences in ALT and AST between groups HEP and SHAM, PRE and GIR, GIR and SHAM and PRE and SHAM (p <0.05). There were also significant differences in the PCNA labeling of the SHAM group as compared to other groups (p <0.05). CONCLUSION: The ischemic preconditioning decreased liver injury, but did not influence the regeneration up to 48 hours.

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: O carcinoma de células renais (CCR) é umas das doenças urológicas de maior malignidade, correspondendo a 1%-3% de todos os tumores sólidos dos adultos. As lesões pré-malignas do CCR ainda não foram totalmente descritas. Achados de displasia intraepitelial tubular renal (DIETR) em áreas próximas ao tumor, livres de neoplasia, sugerem que esta alteração possa ser a precursora biológica de alguns tipos de CCR. O objetivo deste estudo é avaliar a possibilidade do uso de tissue microarray (TMA) no estudo da DIETR e do CCR e os parâmetros para sua utilização imuno-histoquímica (IHQ) utilizando os anticorpos anti-Ki-67 e p53 para confirmar a evidência de DIETR como precursora biológica do CCR. MATERIAL E MÉTODOS: O estudo foi realizado em 10 peças cirúrgicas de nefrectomias realizadas em pacientes com diagnóstico de CCR selecionadas no período de 2000 a 2005, em material arquivado no Instituto Nacional de Câncer (INCA). DISCUSSÃO: A utilização da técnica de TMA permite amostragem de várias áreas e realização da IHQ utilizando apenas duas lâminas, uma para cada marcador. Como não há na literatura descrição de utilização de TMA para estudo da DIETR, foi necessário inicialmente realizar estudo de validação para saber se haveria representatividade de lesões focais no TMA. RESULTADOS: A análise estatística não mostrou diferença entre a utilização de TMA com dois ou quatro cilindros de tecido ou o corte inteiro. CONCLUSÃO: O teste de validação de técnica artesanal de TMA autorizou o uso de dois cilindros de 1 mm² por caso.

INTRODUCTION AND OBJECTIVE: Renal cell carcinoma is one of the most malignant urological diseases, corresponding to 1%-3% of solid tumors in adults. The finding of intratubular epithelial dysplasia (IED) next to tumor areas suggests that this can be the biological precursor of some types of renal cell carcinoma (RCC). The objective of this study is to evaluate the use of tissue microarray (TMA) to study IED and RCC by immunohistochemistry (IHC) with Ki-67 and p53 protein to confirm the evidence that IED is the biological precursor of RCC. MATERIAL AND METHOD: This study was performed in archival material from ten nephrectomy surgical specimens from Instituto Nacional de Câncer, between 2000 and 2005. DISCUSSION: TMA technique allows to sample and study several different areas from many patients in the same slide, using just one slide for each IHC marker. Once there was no previous study on IED by TMA, a validation test was needed first. RESULTS: There was no statistical difference between 2 or 4 tissue cores and the whole section analysis. CONCLUSION: TMA validation assay demonstrated that the use of two tissue cores with 1 mm² each was suitable to evaluate RCC and IED.

INTRODUÇÃO: Vários estudos têm demonstrado associação do vírus Epstein-Barr (EBV) com neoplasias malignas, inclusive genitais, em que o papilomavírus humano (HPV) é o principal vírus associado às neoplasias epiteliais benignas e malignas. OBJETIVO: Investigar a presença do EBV e do HPV em lesões genitais de ambos os sexos, em pacientes soropositivos (grupo A) ou não (grupo B) para o vírus da imunodeficiência humana (HIV). MATERIAL E MÉTODO: Selecionados 126 pacientes e 135 lesões anogenitais, sendo 67 pacientes (53%) e 75 lesões (56%) no grupo A e 59 pacientes (47%) e 60 lesões (44%) no grupo B, para análise imuno-histoquímica (IHQ) por meio dos anticorpos monoclonais antiproteína latente de membrana 1 (LMP1) e HPV (DAKO®). RESULTADOS: A análise mostrou que o número total de lesões com imunopositividade para o HPV e para a LMP1 foi maior no grupo A (32 e 35, respectivamente) quando comparado ao B (16 e seis, respectivamente). A análise estatística (nível de significância de 5%) mostrou que as proporções para o HPV não são estatisticamente significativas (z = 1,93; valor p = 0,053). Entretanto, para a LMP1, a diferença (47% no grupo A e 10% no B) é significativa (z = 4,60; valor p = 4,2×10-6). Do mesmo modo, a associação HPV-LMP1 (21% no grupo A e 7% no B) também mostrou diferença estatisticamente significativa (z = 2,38; valor p = 0,017). CONCLUSÃO: Esses resultados indicam a possibilidade de sinergismo da infecção pelo EBV e a coinfecção EBV-HPV em lesões epiteliais genitais, particularmente em pacientes soropositivos para o HIV. Entretanto, investigações com metodologia de maior especificidade e sensibilidade são necessárias para a verificação da real participação do EBV na patogênese de lesões epiteliais genitais.

INTRODUCTION: Several studies have demonstrated the association between Epstein-Barr virus (EBV) and malignant neoplasias, including genital lesions, in which the human papillomavirus (HPV) is the main virus associated with both benign and malignant epithelial neoplasias. OBJECTIVE: Investigate the presence of EBV and HPV in genital lesions in HIV-infected patients (group A) or HIV non-infected patients (group B) from both genders. MATERIAL AND METHOD: We selected 126 patients and 135 anogenital lesions, comprising 67 patients (53%) and 75 lesions (56%) from group A and 59 patients (47%) and 60 lesions (44%) from group B, to histopathological and immunohistochemical analyses through latent membrane protein 1 (LMP1) monoclonal antibodies and HPV (DAKO®). RESULTS: The analysis showed that the total number of lesions with immunopositivity for HPV and for LMP1 was higher in group A (32 and 35 respectively) in comparison with B (16 and six respectively). Statistical analysis (significance level of 5%) showed that the proportions for HPV are not statistically significant (z = 1.93; value p = 0.053). However, the difference (47% in group A and 10% in B) is significant for LMP1 (z = 4.60; value p = 4.2×10-6). Similarly, the association of HPV and LMP1 (21% in group A and 7% in B) also showed a significant statistical difference (z = 2.38; value p = 0.017). CONCLUSION: The results demonstrated the possibility of synergism between EBV infection and EBV-HPV co-infection in genital epithelial lesions, mainly among HIV-infected patients. However, further investigations with a more specific and sensitive methodology are required in order to assess the real influence of EBV on the pathogenesis of genital epithelial lesions.